對于色譜柱的知識(shí)科普，你可以來參觀一下，讓你之后更好的使用它。 Wondasil色譜柱內(nèi)徑知識(shí)說明：柱效率與柱半徑平方成反比，內(nèi)徑越小柱效越高，但內(nèi)徑越大，柱容量也增加，允許進(jìn)樣量就越多。當(dāng)進(jìn)樣量超過柱容量時(shí)，則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡，將會(huì)導(dǎo)致色譜蜂畸變，柱分辨率降低，重現(xiàn)性不好。因此對于復(fù)雜樣品需要精確分離，必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物，為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子，目前實(shí)驗(yàn)室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
Wondasil色譜柱保存方法和峰形異常原因：
保存：短期保存(隔夜或隔周末)用所用的流動(dòng)相(不含緩沖鹽)保存為佳，以盡量減少下次使用的平衡時(shí)間。一般只建議在長期保存反相柱的時(shí)候用純醇或乙腈，使用80％左右有機(jī)相保存也屬好的選擇，且足以避免長菌。強(qiáng)烈建議在柱身上貼標(biāo)簽標(biāo)明保存溶劑。離子交換柱和水性凝膠柱等適合保存在水溶液中的色譜柱，可加0．05％化鈉溶液防止K菌。正相柱無論是短期還足長期，都推薦保存住所用流動(dòng)相巾。
要長時(shí)間保存，必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲(chǔ)存于水(含防腐劑化鈉或柳硫汞)中，并將購買新島津液相色譜柱時(shí)附送的堵頭堵上。特殊類型色譜柱的儲(chǔ)存，需參考色譜柱說明書，使用島津液相色譜柱廠商推薦的溶劑。
峰形異常：峰形對稱性的優(yōu)劣對峰面積和分離度有很大的影響，從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。先檢查樣品足否過載，由于樣品過載引起的峰形后拖不能通過改變色譜條件消除。如果發(fā)現(xiàn)過載，需降低進(jìn)樣量(包括進(jìn)樣體積或濃度)，進(jìn)樣量越小，峰形越好，例子如頭孢尼西鈉的測定。其次，硅醇基次級保留引起部分峰拖尾。這種情況發(fā)生，選擇高密鍵合和*的雙蜂尾工藝的色譜柱能改善峰形。另外，溶解樣品的溶劑洗脫能力比流動(dòng)相強(qiáng)會(huì)發(fā)生峰前延，所以樣品選用流動(dòng)相溶解。
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